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四川快速制备液相色谱仪价格给您好的建议,赛尔夫科技公司

发布时间:2020-10-20 18:25:27        

色谱法的应用可以根据目的分为制备***谱和分析***谱两大类。制备***谱的目的是分离混合物,获得一定数量的纯净组分,这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。快速色谱使用的柱子一般是玻璃柱,柱直径为3~10cm.长度为7~15cm。相对于色谱法出现之前的纯化分离技术如重结晶,色谱法能够在一步操作之内完成对混合物的分离,但是色谱法分离纯化的产量有限,只适合于实验室应用。制备色谱到底是什么?(1)分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。然而,当色谱柱上样品负载加大的时候,往往导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。制备色谱,要解决容量与柱子效果之间的矛盾,对重现性也要考虑。从经济上来说。制备色谱要争取少用填料,少用溶剂,要尽可能多的得到产品。(2)样品的前处理:制备色谱柱子由于处理的样品多,比分析柱子更容易受污染,所以,必要的前处理就显得非常的必要。萃取、过滤、结晶、固相萃取等简单的分离方法,如果用得上,而且还不是很麻烦,就要尽可能多的采用以去掉杂质。(3)固定相的选择硅胶、键合固定相(如C18)、离子交换树脂、聚酰胺、氧化铝、凝胶等都可以作为色谱柱的填料。 有不少文献报道,对填料可以进行一下处理提高了分离效果,如,对硅胶进行的(或缓冲液)处理。



液相色谱仪是属于易学难用的仪器,特别讲究“正确使用”和经验。液相工作者接触多的是流动相,流动相也是造成液相色谱各种问题的主要源头。液相色谱常见的故障一是堵,二是漏。下面就这两分别展开讨论(流动相以甲1醇为例,色谱柱以C18为例) 。

为何会堵?

“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是***。



液相色谱仪在使用过程中难免会接触到腐蚀性的物质。这些腐蚀性物质不论是气体、液体还是固体,都有可能损坏仪器的材料和零部件,降低色谱仪的使用寿命。在使用时要尽量避免这种情况的出现。 液相色谱仪流动相类型有多种,流动相性质对样品的分离影响很大。

液相色谱仪流动相类型: 1、按组成可分:单组分流动相和多组分流动相。等所有问题解决后,将色谱柱出口从瓶中取出,保证柱端口无溶剂残留,再进行下一步的安装。 2、按极性可分:极性流动相、弱极性流动相和非极性流动相。 3、按作用可分:底剂和洗脱剂。 4、按使用方式可分:等度流动相和梯度流动相。 5、按用途可分:己烷、乙1酸乙1酯、乙醇、乙1腈和水等。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相,可以灵活调节流动相的极性和增加选择性,改进分离和调整出峰时间。



液相色谱仪的常规操作及维修:  1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。  2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。  3、打开HPLC工作站,连接好流动相管道,连接检测系统。  4、进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。由于反相介质表面为强烈疏水性,并且流动相为低极性的有机溶1剂,生物活性大分子在RPC分离过程中容易变性失活,所以,以回收生物活性蛋白质为目的时,应注意选用适宜的反相介质。  5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10ml/min。  6、调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。  7、设计走样方法。点击file,选取se-lectusersandmethods,可以选有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击newmethod。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:a、进样前的稳流,一般2-5分钟;b、基线归零;c、进样阀的loading-inject转换;d、走样时间,随不同的样品而不同。  8、进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击trun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。  9、关机时,先关计算机,再关液相色谱。


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